ЛАБОРАТОРНАЯ работа №21
Влияние рН среды на активность амилазы слюны
Каждый фермент проявляет максимум своего каталитического действия при строго определенном рН среды.
Реактивы: раствор слюны (свежую слюну разводят водой в 100 раз); 0,5 %-й раствор крахмала;0,1 М раствор лимонной кислоты;0,2 М раствор гидрофосфата натрия; раствор иода в иодиде калия (см. работу №11).
Оборудование: пробирки; водяная баня; пипетки.
Ход работы
- В 7 пронумерованных пробирок налейте растворы лимонной кислоты и гидрофосфата натрия в количествах, указанных в табл., получая таким образом буферные смеси со значениями рН от 5.6 до 8,0.
- В каждую пробирку добавьте 10 капель 1 %-го раствора хлорида натрия, 10 капель 0,5 %-го раствора крахмала и 10 капель раствора слюны.
|
№ пробирки |
Объем 0,2 Мраствора Na2HPO4, см3 |
Объем0,1 Мраствора лимонной кислоты, см3 |
рН буферной смеси |
Окраска раствора после добавления иода |
|
1 |
0,58 |
0,42 |
5,6 |
|
|
2 |
0,63 |
0,37 |
6,0 |
|
|
3 |
0,69 |
0,31 |
6,4 |
|
|
4 |
0,77 |
0,23 |
6,8 |
|
|
5 |
0,87 |
0,13 |
7,2 |
|
|
6 |
0,94 |
0,06 |
7,6 |
|
|
7 |
0,97 |
0,03 |
8,0 |
|
- Содержимое хорошо перемешайте и поставьте пробирки в водяную баню при температуре 37 – 38 оС.
- Через 10 мин. пробирки быстро охладите и добавьте в каждую пробирку по капле раствора иода.
- Содержимое пробирок перемешайте и сравните окраску полученных растворов.
Оформление результатов
Результаты исследования оформите, заполнив вышеприведенную таблицу. Установите, при каком рН произошло наиболее полное расщепление крахмала (желтая или буровато-желтая окраска с иодом).