Лабораторная работа№ 14

 

Определение температурного оптимума ФПФазы

 

Скорость ферментативных реакций, так же как и химических, с увеличение температуры возрастает. Однако при температуре более 50 ^оС может происходить денатурация фермента, что в свою очередь может привести к снижению или полной потери  активности фермента.

Реактивы: 0,3 М Na-ацетатный буфер рН 5,8,3 мМ пНФФ в0,3 М Na-ацетатном буфере рН 5,8, 0,1 н NaOH, препарат фермента.

Оборудование: термостат, спектрофотометр, автоматические пипетки, пробирки, штатив.

Ход работы

 При определении температурного оптимума ферментативную реакцию проводят в интервале температур 10 – 90 ^оС. Условия проведения ферментативной реакции указаны в лабораторной работе №12. В этом случае изменяют температуру инкубации, как указано выше. На основе полученных данных строят график зависимости скорости реакции от температуры. По графику устанавливают температурный оптимум реакции.