Лабораторная работа №48

 

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ

АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ

Витамин С (аскорбиновая кислота) яв­ляется одним из важнейших факторов питания. Суточная потребность в витамине С для человека сотавляет 75 мг. Недостаток или отсутствие витамина С в пище в те­чение продолжительного времени приводит к тяжелому заболеванию, известному под названием цинги, или скорбута.

Аскорбиновая кислота весьма нестойка и легко окисляется на воздухе. Нагревание ускоряет окисление (разрушение)  витамина С.

Таблица  1. Содержание витамина С в некоторых продуктах

¹ Северные разновидности шиповника богаче витамином С, чем южные. Сушеный шиповник,поступающий в продажу,  содержит обычно от 1 до 5 % аскорбиновой кислоты.

Содержание витамина С в некоторых пищевых про­дуктах приведено в табл.1.

Витамин С участвует в окисли­тельно–восстановительных процессах. Имеются предполо­жения, что витамин С участвует в реакциях гидроксилирования пролина и лизина при синтезе коллагена, синтезе гормонов коры надпочечников (кортикостероидов), аминокислоты триптофана и, возможно, в других реакциях гидроксилирования. Имеются доказательства о необходимости участия витамина С в окислительном распаде тирозина и гемоглобина в тканях.

Аскорбиновая кислота может восстанавливать 2,6–дихлорфенолиндофенол. При этой реакции витамин С пе­реходит в окисленную форму (дегидроаскорбиновую  кислоту). Реакция идет следующим образом:

 

Реактивы: 10 %-й  раствор соляной кислоты,0,001 М раствор 2,6–дихлорфенолиндофенола (натриевая соль), исследуемый раствор витамина С, 3 %-й раствор перекиси водорода.

 Оборудование: микробюретка, ступка с пестиком, штатив с пробирками, конические колбы емкостью 50 мл, мерная колба емкостью 50 мл, воронка, пипетка на 5 мл, битое стекло.

Задание 1. Качественная реакция на витамин С.

Водный раствор натриевой соли 2,6–дихлорфенолиндофенола окрашен в синий цвет благодаря окраске аниона дихлорфенолиндофенола (хиноидная структура); в кислой среде недиссоциированная молекула ди­хлорфенолиндофенола имеет розовую окраску, при восстановлении же он обесцвечивается. Изменениями окраски этого индикатора и пользуют­ся как для качественной реакции на витамин С, так и для количественного определения его.

Ход работы

1. Налейте в 2 пробирки по 2 – 3 мл исследуемого раствора, содержащего витамин С.
2. В одну из пробирок добавьте несколько капель перекиси водорода и проки­пятите раствор для разрушения витамина  С.
3. Добавьте в обе пробирки по 1 – 2   капли   раствора соляной кислоты и затем (при легком   встряхива­нии) по каплям прилейте  раствор натриевой соли 2,6–дихлорфенолиндофенола. При наличии витамина С раствор обесцвечивается. При дальнейшем прибавлении индикатора раствор  окрашивается  в  розовый цвет, так как вся аскорбиновая кислота в пробе уже окислена и индика­тор более не восстанавливается. В пробирке, где вита­мин С  был   разрушен,  обесцвечивания   не  происходит и даже от 1 – 2 капель индикатора появляется розовое окрашивание.

Задание 2. Количественное определение витамина с 2,6–дихлорфенолиндофенолом  (по Тильмансу)

Метод количественного определения аскорбиновой кис­лоты основан на ее способности восстанавливать 2,6–дихлорфенолиндофенол, которым титруют исследуемый раствор в кислой среде, предохраняющей аскорбиновую кислоту от разрушения. Точному количественному оп­ределению аскорбиновой кислоты могут мешать другие легко окисляемые вещества, такие, как глютатион, цистеин и др.

Ход работы

1. Приготовьте вытяжку из хвои. Точную навеску хвои массой1 г тщательно разотрите в фарфоровой ступке со щепоткой битого стекла (песка) с 5 мл 

     2 % – го раствора соляной кислоты, затем без потерь (обмывая ступку и пестик тем же раствором со­ляной кислоты) перенесите содержимое ступки в мерную колбу емкостью 50 мл и доведите дистиллированной во­дой до метки. Содержимое колбы тщательно перемешайте, профильтруюете через бумажный фильтр, фильтрат используйте для определения витамина С.

2. Титрование. В 2 конические колбочки отмерьте пипеткой по 5 мл фильтрата, и протитруйте из бюретки0,001 Мрастаором 2,6–дихлорфенолиндофенола до появления розового окрашивания, не исчезающего око­ло 30 с.

Расчет количества аскорбиновой кислоты в пробе проведите исходя из того, что 1 мл 0,001 М раствора 2,6 – дихлорфенолиндофенола соответствует 0,088 мг аскорбиновой кислоты. При расчете на 100 г вещества необходимо учитывать также разведе­ние и количество исходного вещества.