ЛАБОРАТОРНАЯ  работа  №34

 

Количественное определение глюкозы

 

Глюкоза при нагревании с ортотолуидиновым реактивом дает зеленую окраску, интенсивность которой пропорциональна концентрации глюкозы.

Реактивы: ортотолуидиновый реактив, стандартный раствор глюкозы 1 мг/мл, раствор глюкозы неизвестной концентрации.

Оборудование: Спектрофотометр, пипетки, водяная баня, штатив, пробирки.

Ход работы

К 0,2 мл стандартного раствора глюкозы и 0,2 мл раствора с неизвестной концентрацией добавить по 2 мл ортотолуидинового реактива. Пробирки со смесью поместить в кипящую водяную баню на 8 минут. Пробирки вынуть, охладить под струей водопроводной воды до комнатной температуры.

Оптическую плотность раствора измеряют при длине волн 590 – 650 нм. Расчет ведут по формуле:

 

Сх =	Ех	* Сст
	Ест

 

 

где:

  С_х – концентрация глюкозы в исследуемом растворе (мг/мл);

  С_ст – концентрация глюкозы в стандартном растворе (мг/мл);

  Е_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

  Е_ст – оптическая плотность стандарта.