Лабораторная работа №30
Характеристика препаратов нуклеиновых
кислот
Реактивы: раствор ДНК – 0,003 %.
Оборудование: спектрофотометр, термостат.
Ход работы
Чистоту препаратов нуклеиновых кислот определяют по спектру поглощения препарата в ультрафиолетовой области и по величине отношений Е260 : Е230 и Е240 : Е280.
В спектрофотометрическую кювету наливают 3 мл раствора ДНК (0,003%) и на спектрофотометре измеряют оптическую плотность (Д) при длине волн: 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300 нм.
На основе полученных данных строят график зависимости Д (ДНК) от длины волны, т.е спектр поглощения ДНК. Находят максимум поглощения в ультрафиолетовом свете препарата ДНК. Затем определяют отношения Е260 : Е230 и Е240 : Е280. Для препаратов нуклеиновых кислот достаточно хорошо очищенных от примесей белков и полисахаридов, эти показатели должны быть в пределах 2,1 – 2,4. Делают вывод о чистоте исследованного препарата ДНК.