Работа 3. Диагностика повреждения растительной ткани по увеличению ее проницаемости
Данный метод основан на том же принципе, что и описанный в предыдущей работе способ определения влияния высоких температур на проницаемость цитоплазмы: чем больше повреждающее действие фактора, тем больше антоциана выходит в окружающую среду.
Материалы и оборудование. Корнеплод свеклы столовой, 30 %-я уксусная кислота, 50 %-й этиловый спирт, хлороформ, химический стакан на 200 – 250 см3, химические пробирки (5 шт.), коническая термостойкая колба на 100 см3, стеклянные пипетки на 10 см3, набор кювет для КФК-2, корковые пробки для пробирок (3 шт.), пинцет анатомический, стеклограф, штатив для пробирок, штатив для пипеток, кухонный нож, сверло диаметром 0,8 см, плотный картон или разделочная доска размером 15
15 см, дозатор, электрическая плитка, КФК-2.
Ход работы. Из корнеплода свеклы столовой на приблизительно одинаковом расстоянии от его середины сверлом вырежьте кусочки цилиндрической формы высотой 0,5 см (насечки). Тщательно промойте их в стакане, несколько раз сменив водопроводную воду в нем, до тех пор, пока вода не перестанет окрашиваться. Поместите по 2 насечки растительного материала в 5 пробирок, содержащих по 10 см3 различных растворов в соответствии со схемой опыта (см. таблицу 8).
Таблица 8
Схема и результаты опыта
|
№ варианта |
Вариант опыта |
Оптическая плотность раствора |
|
1 |
Контроль (водопроводная вода) |
|
|
2 |
Кипячение + водопроводная вода |
|
|
3 |
Водопроводная вода + 6 капель хлороформа |
|
|
4 |
30% р-р уксусной кислоты |
|
|
5 |
50% р-р этилового спирта |
|
Внимание: 1. Вариант опыта с кипячением выполните следующим образом. В коническую колбочку с кипящей водопроводной водой бросьте две насечки. Через 1 мин достаньте кусочки, охладите и поместите в пробирку с водопроводной водой комнатной температуры.
2. Работу с уксусной кислотой и хлороформом производите под вытяжкой. Пробирки с этими веществами, а также с этиловым спиртом закройте пробками.
Через 30 мин от начала опыта все пробы интенсивно встряхните, достаньте кусочки, охладите растворы и сравните количество вышедших из клеток беталаинов в разных вариантах опыта при помощи КФК-2 за зеленым светофильтром (
нм). В каждом варианте в качестве контроля используйте тот раствор, действие которого вы изучаете. Результаты наблюдений внесите в таблицу 8.
По материалам наблюдений сделайте выводы о степени повреждения протопласта под действием различных факторов и механизмах их воздействия.